产品货号:
KL901115
中文名称:
深加工食品DNA提取试剂盒
英文名称:
Processed Food DNA Purification Kit
产品规格:
100T
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
由于煮蒸烘烤等各种物理处理极大地破坏了深加工食品中DNA的完整性,同时各种食品化学添加剂在上述处理过程中也会与DNA发生复杂的化学反应,所以从深加工食品中提取DNA比从新鲜食物材料中提取要困难很多。为解决这一问题,本公司上开发了深加工食品专用DNA提取试剂盒。
- 适合于大多数植物来源的深加工食品。
- DNA更加纯净,大多数DNA样品的OD260/280值在1.8~1.9之间。
- 所得可直接用于PCR等后续反应。
- 操作简单,整个过程室温操作约10分钟,适合大规模样品处理。
- 本制品为过柱法,只能得到100bp以上的DNA片段。如果需要纯化100bp以下的DNA片段,需要另购本公司的沉淀法深加工食品DNA纯化试剂盒。
- 本试剂盒各成分对人体无毒、无腐蚀性、无刺激性气味。
组分 | 规格 |
深加工食品DNA纯化溶液A | 40mL |
深加工食品DNA纯化溶液B | 20mL |
深加工食品DNA纯化溶液C | 50mL |
去蛋白溶液B | 10mL |
离心吸附柱 | 50套 |
通用洗柱液 | 50mL |
DNA洗脱液 | 10mL |
保存:室温,有效期1年。
本试剂盒足够50次深加工食品样本的微量纯化,每次可以处理100mg左右的样本。
剪切式匀浆机或液氮及研钵
深加工食品DNA纯化溶液A容易产生沉淀,深加工食品DNA纯化溶液B十分粘稠,用前均需要在65℃水浴中加热使沉淀溶解或粘稠度降低,用前充分摇匀。
- 根据使用材料的不同进行下列操作:
- 对固体:先将100mg左右的样品放入10mL或15mL塑料离心管中,加0.8mL预热的深加工食品DNA纯化溶液A,用剪切式匀浆器匀浆30秒左右,然后把裂解液转移到1.5mL塑料离心管中。也可以使用液氮研磨,研磨时将材料放入
研钵中,导入液氮将其冻成固体,用研磨杵将其磨成细粉,然后转移到0.8mL预热的深加工食品DNA纯化溶液A中。 - 对液体及黏稠食材:取200μL样本至离心管中(可将1mL枪头剪掉一截再用),加0.8mL预热的深加工食品DNA纯化溶液A,涡旋混匀。
- 对固体:先将100mg左右的样品放入10mL或15mL塑料离心管中,加0.8mL预热的深加工食品DNA纯化溶液A,用剪切式匀浆器匀浆30秒左右,然后把裂解液转移到1.5mL塑料离心管中。也可以使用液氮研磨,研磨时将材料放入
- 加入0.4mL预热的深加工食品DNA纯化溶液B到上步所得的裂解液中。由于深加工食品DNA纯化溶液B十分粘稠,可将1mL枪头剪掉一截再用,也可以用称量方法加0.4g。加入深加工食品DNA纯化溶液B后需要颠倒数次充分混匀。
- 65℃水浴5~10分钟。如果室温放置,DNA产量将降低10~20%。
- 加入0.2mL去蛋白溶液B,振荡器上充分振荡混均30秒,此时溶液将呈乳白色。
- 一定要确保离心管底的液体被震荡起来。
- 12000~15000g室温离心2分钟。上清透明,中间层为白膜(蛋白层)。
- 小心将上清液平均转移到两个新的离心管中,避免触及中间的白膜。
- 每个管中加入1.5倍体积的深加工食品DNA纯化溶液C,充分颠倒混匀。
- 分两次上柱(即先转移一半的混合液到离心吸附柱中,室温放置2分钟,12000~15000g室温离心半分钟,弃穿透液,然后再将剩下的混合液到离心吸附柱中,室温放置2分钟,12000~15000g室温离心半分钟,弃穿透液)。
- 加0.7mL通用洗柱液到离心吸附柱中,12000~15000g室温离心半分钟,弃穿透液。
- 加0.3mL通用洗柱液到离心吸附柱中,12000~15000g室温离心半分钟,弃穿透液。
- 12000~15000g室温再离心半分钟。此步十分重要,否则残留的通用洗柱液会污染DNA。
- 室温放置半分钟使残留乙醇挥发。
- 将离心吸附柱转移到一新的1.5mL塑料离心管中,加入50~100μL DNA洗脱液,室温放置离心吸附柱1~2分钟。
- 12000~15000g室温离心半分钟,离心管中溶液即为DNA样品,可以立即使用或存放于冰箱待用。
- 由于深加工食品中的DNA都高度降解,所以电泳检测时将不会有完整的DNA条带,只有模糊的一片。
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